CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)是將冠醚衍生物鍵合在硅膠表面而制得。本產品對鉀離子及類似大小的離子結合是不可逆的，即便微量進柱，也會造成識別位點被占據，任何樣品都無保留。因此，在使用前一定要徹di清洗儀器管路、正確配制流動相和樣品溶液，并確認樣品中無鉀離子及類似大小的離子。在使用本產品前請仔細閱讀包裝盒中的英文版使用說明書。

在連接該手性柱進行實驗前，請按以下步驟操作：

1．使用前：

1.1 確認儀器各部件狀態：

• 校準各泵的流速看是否準確。強烈推薦使用單泵（即只使用一個泵），所用的流動相請手配，混合均勻。

1.2 使用溶劑及配制：

• 使用的水溶劑為色譜級純凈水，高氯酸為色譜純或分析純。

• 配制時建議采用以下操作：往水溶液中滴加入高氯酸，充分混勻，倒出約 50mL 到燒杯中，用 PH 計檢測燒杯中的待測溶液，此操作是為避免 PH 計與待配流動相接觸，以免 PH 計中殘留的鉀離子污染待配流動相而導致柱子失去選擇性。如此反復操作。配好后充分混勻后請再次檢測，以確保溶劑 PH 值在實驗規定的范圍內。

• 如果文獻方法不是滴定法，請照文獻方法配制好流動相(同樣要充分攪拌)以后再用 PH 計檢測（檢測方法同上），確認該溶液 PH 值是否在我們規定的使用范圍內。說明書稱重法配制的流動相也按此操作。

• CR-I(+)/CR-I(-)柱所使用的高氯酸水溶液的 PH 范圍為 PH1.0-7.0，通常為 PH1.0-2.0。

1.3 樣品的配制：

• 建議使用流動相溶解樣品，或者純水、或者與流動相組成比例接近的水和有機相來溶解樣品。

• 樣品溶解后，需要用 0.45µm 孔徑的濾膜過濾，確保在使用前無沉淀。

1.4 溶劑切換：

      請在連接色譜柱前，按下述要點徹di做好溶劑切換

• 根據 HPLC 系統中不同的當前流動相，采用不同的沖洗方法清洗所有管路：包括所有溶劑入口、泵、進樣裝置和其他連接管路（在進樣器和檢測器之間用兩通代替色譜柱連接起來）。

• 如果當前流動相是正相流動相（如正己烷/醇），要先用無水乙醇或異丙醇沖洗約 80mL，再用純水沖洗約 80mL，然后用配制好的測試流動相沖洗 50mL，最后連接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色譜柱。

• 如果當前流動相是反相流動相（如水/乙腈、緩沖液/甲醇），要先用純水徹di沖洗（約 100 mL）以除去其中存在的有機溶劑或緩沖液，然后用配制好的測試流動相沖洗約 50 mL，最后連接上 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)色譜柱。

• 注意：其余未用的流路也bi須過渡為純水系統，以免誤操作時讓其他溶劑進入系統，造成嚴重后果。

2．使用中：

2.1 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱一般以高氯酸水溶液(PH 1.0-2.0)為流動相，其他的酸也可以使用，如三氟yi酸、硝酸、甲酸和乙酸。但一般推薦使用高氯酸，多數情況下，分離度更好，紫外吸收也更低。CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱為鍵合柱，可在流動相中添加有機相，具體使用請見說明書。

2.2 該手性柱不能接觸 K＋離子，K＋離子會占據冠醚的手性空穴從而不可逆的損壞手性柱的分離能力。

2.3 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)柱的使用溫度范圍為：-5℃-40℃，柱壓上限為 30MPa，為了您的手性柱有更長的壽命，建議在 10MPa 以內使用。

2.4 強烈推薦使用 CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-)說明書上提到的保護濾器（Guard filter）。

3．使用后：

測試完成后請用 5%甲醇水溶液以 0.3mL/min 沖洗柱子 100min, 為延長手性柱的使用壽命，請將手性柱保存于 3-6℃冰箱中。

使用中常見問題及解決措施：

1. 樣品峰出現分叉情況：

• 可能造成此現象的原因：

    a) 柱子使用過程中流速過大、壓力劇增

    b) 分析樣品過程中有殘渣污染柱頭

    c) 保護柱損壞

• 可采取的應對方法：

    a) 若有保護柱請將保護柱取下后再驗柱

    b) 若還是有分叉現象，請將柱子反接后驗柱

若問題依然存在，請及時與供應商聯系。

2. 出峰不斷提前：

出峰不斷提前是填料不斷流失的表現，主要是由于流動相的 PH 低于 1.0 或有鉀離子進柱，以上情況造成的填料流失是不可逆的損壞，柱子將無法修復。

• 可能造成此現象的原因：

    a) 泵的抽力不正常

    b) 配制的高氯酸水溶液密度不均勻

    c) 在使用前未用純水徹di沖洗整個系統（注意：包括所有溶劑入口、泵、進樣裝置和其他連接管路）

    d) 流動相及樣品溶液中有 K+存在

3. 樣品沒有保留，在 2.0min 左右出峰：

初步斷定是手性填料wan全流失的表現，柱子對手性樣品沒有分離能力，這種損壞是無法修復的。

為了避免以上 2、3 所述情況的出現，請在閱讀英文版說明書注意事項的基礎上，嚴格按照我們的中文補充說明操作。

建議客戶在拿到柱子后嚴格按照大賽璐公司的驗柱報告用標準品檢驗柱子，確認柱子性能。