手性分離用多糖型手性色譜柱

Lux系列直鏈淀粉和纖維素手性選擇器提供了多種互補的選擇性，使您能夠在反相、極性有機、正相和SFC條件下篩選對映體分離條件。

為什么選擇Lux手性色譜柱？

色譜柱特性

色譜柱安裝

您的液相色譜系統的初始設置對確保色譜柱性能至關重要：

• 確保您的液相色譜系統滿足以下條件：

1. 密封、管線和進樣器清潔

2. 已預充管線（沒有干燥的管線或氣泡）

3. 基線穩定

4. 壓強一致

• 使用 HPLC 級、與色譜柱的出廠溶劑混溶的流動相沖洗液相色譜系統泵和管線。

流動相起始條件檢查清單：

1. 使用前，確保 HPLC 級流動相已混合均勻、過濾和脫氣。

2. 確保色譜柱出廠溶劑、液相色譜系統內的剩余溶劑和流動相溶劑混溶。

• 將流速設置為 0.1mL/min（適用于 2.1-4.6mm 內徑），安裝色譜柱，確保箭頭方向與流動方向一致。將流速升高至 0.2mL/min（2.1mm 內徑）或 1.0mL/min（4.6mm 內徑），保持 5-10 分鐘。使用小燒杯收集溶劑。

• 停止流量并擦洗色譜柱的出樣口端以移除任何顆粒，然后再連接到檢測器。 

• 將接頭/管件安裝到出樣口端，并以較低的流速（約 0.2 mL/min）通過至少 10 倍于色譜柱容積的溶劑，同時監測背壓。 

1. 壓強穩定說明流速一致，壓強波動則說明系統中存在氣體。

2. 壓強 da范圍波動可能會沖擊和損壞色譜柱，因此，監測壓強至關重要。

• 監測壓強和檢測器信號，在兩者均穩定后，色譜柱可以投入使用。

SFC 色譜柱安裝 

1. 將色譜柱安裝在 SFC 儀器柱溫箱室中

2. 將 SFC 儀器背壓調節器設置為大約 80-100bar，并在使用前用至少十倍于色譜柱容積的 SFC 流動相平衡色譜柱 

3. SFC 流動相一種比較好的起始選擇是 CO2/甲醇或 CO2/乙醇（體積比為 80:20），帶或者不帶添加劑均可。 

4. 4.6mm 內徑色譜柱的zui 佳流速為 3-6mL/min。我們建議將流速逐漸升高到 3mL/min，以免背壓超過 300bar (4300psi)。

溶劑切換 

在從一種流動相轉換到另一種時，必xu采用適當的色譜柱清洗程序。在清洗時bi須仔細考慮不同流動相成分的混溶性。建議將 Lux 涂層色譜柱專門用于正相、反相或極性有機模式。不建議在不同的運行條件下來回切換。

正相到極性有機或反相

要將色譜柱從正相安全地轉移到極性有機或反相條件，請使用以下程序： 

1. 將流速設為 0.5mL/min

2. 使用 10 倍于色譜柱容積的甲醇/乙醇（體積比為 90:10）沖洗色譜柱

a. 例如，為 250 x 4.6mm 色譜柱使用 25mL

3. 使用至少 10 倍于色譜柱容積的新流動相活化色譜柱。 

**如果您的反相流動相緩沖液的鹽在甲醇和/或乙醇中不混溶，請在甲醇/乙醇步驟后使用水簡單地沖洗色譜柱，然后使用 10 倍于色譜柱容積的反相或極性有機流動相活化色譜柱。 

反相到正相 

在 Lux 色譜柱（i-Amylose-1 和 i-Cellulose-5 除外）處于反相模式后，不建議從反相切換回正相。

極性有機到正相 

在 Lux 色譜柱（i-Amylose-1 和 i-Cellulose-5 除外）處于極性有機模式后，不建議切換到正相模式。

正相、極性有機或反相到 SFC

1. 使用甲醇/乙醇（體積比為 90:10）并將流速設為 0.5mL/min。

2. 在切換到 CO2 之前，使用至少 10 倍于色譜柱容積的溶劑沖洗。

3. 使用 SFC 溶劑活化時，將流速降低至 0.3mL/min，直至甲醇/乙醇沖出。

SFC 到正相、極性有機或反相

1. 使用甲醇/乙醇（體積比為 90:10）并將流速設為 0.5mL/min。

2. 使用至少 10 倍于色譜柱容積的溶劑沖洗，直至 CO2 被吹出。

3. 然后，使用至少 10 倍于色譜柱容積的新流動相活化。

典型流速、背壓、溫度

下面是常見規格的 Lux HPLC 色譜柱的一些典型值。這些數字不是絕dui值，并且在不同的液相色譜系統、運行參數和樣品分析物/基質下可能不同。以下的數值經由己烷和 IPA 組成的溶劑系統創建。

背壓上限 

• Lux 液相色譜分析柱的建議zui 大壓強為 4500psi (310bar)，AXIA™制備柱為 3625psi (250bar)，不過，壓強限值取決于您的運行參數和系統，并且可能發生變化。 

溫度上限 

• Lux 液相色譜柱的建議溫度上限不超過 50°C，不過，溫度限值取決于您的運行參數，并且可能發生變化。

流動相兼容性

Lux 手性固定相（i-Cellulose-5 和 i-Amylose-1 除外）在制造過程中涂有含多糖衍生物的硅膠。因此，即使為痕量，也bi須避免使用任何會溶解多糖衍生物的溶劑，如下所述：

• 四氫*喃、丙酮、氯化烴類、乙酸乙酯、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、N-甲替甲酰胺、甲苯、甲基乙*酮和甲基叔丁醚等。

• Lux i-Cellulose-5 和 i-Amylose-1 的固定化部分可以耐受注射到色譜柱上的強極性有機溶劑（例如 DMSO、DCM、乙酸乙酯、MtBE 和 THF），能夠顯著增強色譜柱的耐 用 性。

Lux 色譜柱在使用含有下述濃度水平添加劑的流動相時，能提供一致的結果。 不過，如果將色譜柱與這些添加劑配合使用，色譜柱柱效可能會出現一定程度的下降。因此，我們建議將色譜柱專 用于含有堿性添加劑的流動相。

對于堿性樣品或酸性手性化合物，要實現手性分離并確保正確的峰形，有時候需要適當的流動相改性劑。

1. 二乙胺、乙醇胺和丁胺 (0.1-0.5%) 可用于堿性分析物

2. 三*乙酸或乙酸 (0.1-0.2%) 可用于酸性分析物。 

3. 也可使用堿性和酸性流動相添加劑的混合物（例如二乙胺乙酸鹽或三氟醋酸鹽）。

色譜柱儲存 

儲存前，務bi確保您的色譜柱清潔。包括移除緩沖液、鹽、樣品和離子配對劑。建議的儲存條件為： 

• 反相：可以使用乙腈/H2O（體積比為 85:15）和甲醇替代乙腈。

• 正相：正己烷/2-丙醇（體積比為 9:1）。

延長色譜柱使用壽命的提示

• 要在長時間使用 Lux 色譜柱后進行再生或移除潛在污染物，我們建議用 100  % 甲醇或乙醇并以適當的流速將色譜柱沖洗 2-3 小時。也可以使用反向沖洗清洗色譜柱。

• 利用固相萃取（Strata®-X SPE 產品）等樣品制備技術或配件（Phenex™針頭式過濾器），以便盡可能減少進入您的系統和色譜柱上的污染物。

• 使用合適的保護柱、保護柱系統 (SecurityGuard™) 在微粒阻塞您的色譜柱之前將其移除。

• 不要讓色譜柱過載。進樣合適的樣品濃度和體積。請參見圖表：典型載樣量

• 在色譜柱的適當分離模式下工作。請參見色譜柱特性表，了解每種固定相適合的典型模式。

• 將您的色譜柱儲存在合適的溶劑中。

• 以較低流速從一種混溶溶劑緩慢富集到另一種，正確執行溶劑切換：2.1mm 內徑為 0.1mL/min，4.6mm 內徑為 0.5mL/min。

典型載樣量

若您在使用飛諾美Lux手性色譜柱過程中遇到任何問題，請及時聯系購買的供應商！